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多食棘阿米巴屬通用PCR檢測試劑盒說明書

更新時(shí)間:2024-12-02

簡要描述:

多食棘阿米巴屬通用PCR檢測試劑盒說明書我司提供PCR試劑盒的類別有流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、冠狀病毒、輪狀病毒、桿菌、鏈球菌、熱帶病毒等等核酸檢測試劑盒。

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多食棘阿米巴屬通用PCR檢測試劑盒說明書組成及試劑配制:
1、 酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
多食棘阿米巴屬通用PCR檢測試劑盒說明書3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。

樣本采集、存放及運(yùn)輸:
多食棘阿米巴屬通用PCR檢測試劑盒說明書1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。

特點(diǎn)優(yōu)勢:
    1.特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
    2.   重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
    3.   靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
    5.   優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

    6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

phospho-Dnmt1(Tyr399) 磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體

DHCR7 7脫氫還原酶抗體

Dbx2 大腦發(fā)育同源蛋白2抗體

DEGS1 退行性精母細(xì)胞同源物1抗體

DSCC1 DSCC1蛋白抗體

DcR2 誘捕受體2抗體

DMAP1 DNA甲基轉(zhuǎn)移酶相關(guān)蛋白1抗體

DMC1 減數(shù)分裂同源蛋白DMC1抗體

DNA Ligase III DNA連接酶3抗體

phospho-DNA PKcs (Thr2638) 磷酸化DNA依賴性蛋白激酶抗體

phospho-DNA PKcs (Thr2647) 磷酸化DNA依賴性蛋白激酶抗體

DNA polymerase delta p50 DNA聚合酶δ2/DNA pol δ 2抗體

DNA Polymerase delta, catalytic subunit DNA聚合酶δ催化亞單位/DNA pol δ cat抗體

DNA polymerase eta DNA聚合酶η抗體

DNA Polymerase gamma DNA聚合酶γ/DNA pol γ抗體

DNA Polymerase iota DNA聚合酶ι/DNA pol ι抗體

DNA Polymerase Kappa/POLK DNA聚合酶κ/DNA pol κ抗體

DNA Polymerase lambda DNA聚合酶λ/DNA pol λ抗體

DNA polymerase mu DNA聚合酶μ/DNA pol μ抗體

DNAJA2 細(xì)胞周期蛋白3抗體

DNAJC9 DNAJC9蛋白抗體

Dnmt2 DNA甲基轉(zhuǎn)移酶2抗體

Dnmt3L DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3L抗體

DPP10 二肽基肽酶10抗體

DPP3 二肽氨基肽酶3抗體

DREF DNA復(fù)制相關(guān)元件結(jié)合因子抗體

DRIL1 B淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白DRIL1抗體

DRIP130 轉(zhuǎn)錄共激活因子130抗體

Drosha 核糖核酸酶3/Drosha抗體

DTYMK 脫氧胸苷酸激酶DTYMK抗體

多食棘阿米巴屬通用PCR檢測試劑盒說明書DUSP10 雙特異性蛋白磷酸酶10抗體

DUSP5 雙特異性蛋白磷酸酶5抗體

phospho-Dynamin 1 (Ser774) 磷酸化酶動(dòng)力蛋白1抗體

Dynamin 1 酶動(dòng)力蛋白1抗體

phospho-Dynamin 1 (Ser778) 磷酸化酶動(dòng)力蛋白1抗體

Dynorphin A 腦啡肽A抗體

DMWD 強(qiáng)直性肌營養(yǎng)不良相關(guān)蛋白9抗體

DYX1C1 DYX1C1蛋白抗體

DZIP3 E3泛素蛋白連接酶dzip3抗體

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